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產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
所在地:上海市
更新時(shí)間:2017-02-08
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
品牌 | BIM |
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一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱(chēng) | 原裝ELISA試劑盒,人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 |
檢測(cè)方法 | 酶聯(lián)免疫法 |
產(chǎn)品種屬 | 人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、豬(PoFAine)、兔(Rabbit)、雞(Chiken)…… |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T 48T |
產(chǎn)品品牌 | BIM 滬鼎生物 TSZ |
保存條件 | 短期4℃/長(zhǎng)期-20℃保存 |
保 質(zhì) 期 | 六個(gè)月 |
使用目的 | 本試劑盒用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中產(chǎn)品含量。 |
可測(cè)標(biāo)本 | 血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等。 |
運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃,避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開(kāi)封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定,前提是將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。
二、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要用到的器材
1.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀;
2.高速離心機(jī);
3.電熱恒溫培養(yǎng)箱;
4.干凈的試管和Eppendof管;
5.系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器;
6.蒸餾水,容量瓶等。
三、“原裝ELISA試劑盒,人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒”操作方法
各種類(lèi)型ELISA測(cè)定時(shí)一般需經(jīng)過(guò)這些步驟:固相包被→加待測(cè)樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。
1.按說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。
2.ELISA試劑盒中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。
3.從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。
4.試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
四、ELISA結(jié)果處理
1.ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
2.平均OD值減去空白孔的OD值。
3.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對(duì)數(shù)、對(duì)數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù),將對(duì)應(yīng)的OD值帶入該方程,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度zui高的那條曲線。
五、結(jié)果判斷
常用下列幾種方法表示結(jié)果:
1.定性測(cè)定
2.半定量測(cè)定 結(jié)果一般以滴度表示。
3.定量測(cè)定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
六、“原裝ELISA試劑盒,人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒”注意事項(xiàng)
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在 4 ℃ 備用,如有特殊 原因需要周期收集標(biāo)本,
將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時(shí), -20 ℃ 可保存 1 個(gè)月。 -70 度可保存 6 個(gè)月。部分激素類(lèi)標(biāo)本需添加抑肽酶。
液體類(lèi)標(biāo)本:
標(biāo)本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。 1ml 的 全血可得到 0.5ml 的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積= 100ul × 檢測(cè)種類(lèi)。取材前須向銷(xiāo)售人員索要說(shuō)明書(shū)。
血清:
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
尿液、胸腹水、腦脊液:
用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀
釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn) /ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的 PBS ,緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶)。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻
漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。