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產(chǎn)品型號(hào):TGF-α
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
所在地:上海市
更新時(shí)間:2016-06-22
產(chǎn)品簡介:
品牌 | R&D/美國 |
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“小鼠轉(zhuǎn)化生長因子αELISA試劑盒”具體參數(shù)
產(chǎn)品規(guī)格:96T 48T
公司服務(wù):ELISA試劑盒 免費(fèi)代測
檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
產(chǎn)品范圍: 人,小大鼠,豬,兔,其它動(dòng)物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽,自身抗體 ,血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌,自身抗體科研ELISA檢測試劑盒
待檢樣本:體液,血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗C3抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月
運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。
“小鼠轉(zhuǎn)化生長因子αELISA試劑盒”具體參數(shù)樣品采集:
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
具體參數(shù)操作步驟
ELISA試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1.正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2.在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4)酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
“小鼠轉(zhuǎn)化生長因子αELISA試劑盒”報(bào)告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)
1、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線;
2、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟;
3、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑耗材,實(shí)驗(yàn)方法,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果說明);
4、實(shí)驗(yàn)進(jìn)行階段,我公司客服人員會(huì)及時(shí)向您匯報(bào)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
5、本產(chǎn)品是否開具增票普票請(qǐng)致電我司業(yè)務(wù)員。
客戶須知
1、液體類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等);
2、樣本保存:請(qǐng)盡早檢測,2-8℃保存一天;需更長時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后,置-20℃或-70℃保存;
3、請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測指標(biāo)及其他特殊要求。
產(chǎn)品結(jié)算方式:款到發(fā)貨;(長期合作老客戶可享受優(yōu)先發(fā)貨權(quán))
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