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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

所在地:上海市

更新時(shí)間:2016-03-15

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行
檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

產(chǎn)品特性Product characteristics
品牌R&D/美國(guó)

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13試劑盒

英文名稱:Mouse matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA KIT

貨號(hào):HD-30087K

性狀:液體 

規(guī)格: 96T 

種屬:Mouse 

樣本類型: serum, plasma, tissue homogenates

所需樣本體積: 50-100ul

檢測(cè)波長(zhǎng): 450 nm

反應(yīng)時(shí)間: 1-5h

檢測(cè)方法:ELISA酶聯(lián)免疫法

檢測(cè)范圍: 詳見說明書 

靈敏度: 詳見說明書 

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13試劑盒用途: For research use only. Not for diagnostic or therapeutic

Storage and validity

1.Storage:  2-8℃.

2.validity: six months.

運(yùn)輸條件:

低溫運(yùn)輸,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。 

常見的問題及解答

問:抗原檢測(cè)出的分子量比資料上的大,是怎么回事?

答:a)抗原形成了二聚體。增多巰基乙醇量,煮沸變性時(shí)間延長(zhǎng),可以打開二聚體。b)蛋白本身的修飾如:糖基化,磷酸化等

問:蛋白轉(zhuǎn)移不到膜上,但膠上有,同時(shí)Marker 轉(zhuǎn)上去了,為什么?

答:可能是:a)樣品濃度過低;b)轉(zhuǎn)移時(shí)間不夠,。

問:磷酸化抗體的檢測(cè)樣本制備時(shí)是否一定要加NaF等?

答:NaF是一種廣譜磷酸化酶的抑制劑,一般加。但是不加也可以,大部分時(shí)候是不用加的。

問:要驗(yàn)證某個(gè)細(xì)胞上有無該蛋白的存在,需要做免疫組化和western blot試驗(yàn)嗎?做這兩個(gè)試驗(yàn)時(shí)的一抗和二抗可以共用嗎?

答:①免疫組化可以用來進(jìn)行定位,但是不能精確定量,而且有時(shí)會(huì)有假陽(yáng)性,不易與背景區(qū)分;Western blot可以特異性檢測(cè)某個(gè)蛋白質(zhì)分子,進(jìn)行定量,但是不能定位。

②兩種實(shí)驗(yàn)的一抗有時(shí)候不能通用,公司的產(chǎn)品說明一般都會(huì)說明可以進(jìn)行什么實(shí)驗(yàn),在免疫組化時(shí),是否適合石蠟切片或者冰凍切片。

問:做Western Blot時(shí),提取蛋白后凍存(未加蛋白酶抑制劑),用的博士德的一抗,開始還有點(diǎn)痕跡,現(xiàn)在越來越差,上樣量已加到120μg,換了個(gè)santa cloz的一抗仍不行。是什么原因?蛋白酶抑制劑單加PMSF行嗎?

答:懷疑是樣品問題,可能是:1,樣品不能反復(fù)凍融;2,樣品未加蛋白酶抑制劑。同時(shí),建議檢查Western Blot過程,提高一抗?jié)舛?。?duì)于加蛋白酶抑制劑來說,一般加PMSF就可以了,能多加幾中種蛋白酶抑制劑。

問:細(xì)胞水平要做western blot,多少細(xì)胞提的蛋白夠做western blot? 

答:一般5×10^6就足夠了

問:同一樣品能同時(shí)提RNA又提蛋白么?這樣對(duì)western blot有無影響? 

答:能,沒有問題。

問:同一蛋白樣品能同時(shí)進(jìn)行兩種因子的Western Blot檢測(cè)嗎?

答:當(dāng)然可以,有的甚至可以同時(shí)測(cè)幾十種樣品。

問:如果目標(biāo)蛋白是膜蛋白或是胞漿蛋白,操作需要注意什么?

答:如果是膜蛋白和胞漿蛋白,所用的去垢劑要溫和得多,這時(shí)加上NaF去抑制磷酸化酶的活性。

問:我的樣品的蛋白含量很低,每微升不到1微克,但是在轉(zhuǎn)膜時(shí)經(jīng)常會(huì)發(fā)現(xiàn)只有一部分蛋白轉(zhuǎn)到了膜上,就是在轉(zhuǎn)膜后染膠發(fā)現(xiàn)有的孔所有的蛋白條帶都在,只是顏色變淡了,有什么辦法可以解決?

答:你可以加大上樣量,沒有問題,還有轉(zhuǎn)移時(shí)你可以用減少電流延長(zhǎng)時(shí)間,加20%甲醇。

購(gòu)我司,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,提供免費(fèi)代測(cè),實(shí)驗(yàn)過程中有任何疑問都可以技術(shù)人員,我們將為您一一解答。

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