服務(wù)熱線
18221656311
歡迎訪問上海滬鼎生物科技有限公司網(wǎng)站
日期:2019/5/9瀏覽:586次
常曉波(漢中三二0一醫(yī)院,陜西 漢中 723000)
[摘 要] 目的:探討板藍(lán)根抗內(nèi)毒素的作用效果。方法:兩組均通過板藍(lán)根處理小鼠腹腔巨噬細(xì)胞,試驗(yàn)組另使用LPS刺激,觀察TNF-α和IL-6的產(chǎn)生情況。結(jié)果:板藍(lán)根預(yù)處理小鼠腹腔巨噬細(xì)胞能明顯降低TNF-α和IL-6的量(P<0.05),抑制率有差異。結(jié)論: 板藍(lán)根抗內(nèi)毒素作用效果明顯。
[關(guān)鍵詞] 板藍(lán)根;內(nèi)毒素;巨噬細(xì)胞;LPS;TNF-α;IL-6
板藍(lán)根是十字花科植物菘藍(lán)的根,是臨床上常用的清熱解毒的中藥,具有抗菌、抗病毒、抗癌、增強(qiáng)免疫力、抗細(xì)菌內(nèi)毒素等多種功能[1]。腫瘤壞死因子TNF-α、白細(xì)胞介素-6(IL-6)等, 進(jìn)而引起機(jī)體發(fā)熱、休克、血管內(nèi)彌散性凝血等反應(yīng),對(duì)患者造成嚴(yán)重的損傷,甚至死亡。以小鼠腹腔巨噬細(xì)胞作為對(duì)象,研究板藍(lán)根對(duì)LPS刺激產(chǎn)生TNF-α和IL-6的作用,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1資料與方法
1.1一般資料:①試劑:板藍(lán)根購(gòu)于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中藥房,
LPS(湛江安度斯生物有限公司,010203),小鼠TNF-αELISA 試劑盒( 江萊生物科技有限公司, 貨號(hào): ELISA 2266 ), 小鼠IL-6 ELISA試劑盒(上海滬鼎生物科技有限公司,HD-
30163k)。②實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:周齡4周的昆明小鼠,20 g左右,雌雄各15只,均購(gòu)于北京維通利華有限公司。
1.2實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的制備:給予昆明小鼠腹腔注射2 mg/ 只BCG,4 d后經(jīng)過脫頸椎處死小鼠,給小鼠腹腔注射5 ml含有100 U/ml青霉素、100 μg/ml鏈霉素和10 U/ml肝素的RPMI160
(GIBCO)培養(yǎng)液,輕柔腹部,抽取腹腔液體,1 500 r/min,
5 min, 用RPMI 160 洗滌細(xì)胞兩次, 接種于含10 % 胎牛血清
(Hyclone)的RPMI160培養(yǎng)液,于37℃,5% O2,95% CO2的培養(yǎng)箱(Thermo)中進(jìn)行培養(yǎng)2 h,洗去未貼壁的細(xì)胞,剩下的貼壁細(xì)胞即為巨噬細(xì)胞。
1.2.2板藍(lán)根溶液的配置:取100 g板藍(lán)根置于700 ml蒸餾水煎煮
1.5 h,濾渣加500 ml蒸餾水繼續(xù)煎煮1 h,過濾,將所有濾液濃縮至100 ml。
1.2.3 分組處理:取2×106個(gè)細(xì)胞/ml至于24孔板,隨機(jī)分為兩組,5孔/組,其中板藍(lán)根組每孔加1 ml板藍(lán)根處理細(xì)胞1 h,然后加LPS至終濃度50 ng/ml,對(duì)照組不加板藍(lán)根預(yù)處理,直接加LPS 處理,24 h后,取上清液用ELISA檢測(cè)TNF-α和IL-6的含量,抑制率=(1-板藍(lán)根處理組含量/對(duì)照組含量)×100%。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理: 使用SPSS 17 . 0 對(duì)各項(xiàng)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析, 各項(xiàng)參數(shù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x ? s ) 表示, 采用t 和χ 2 檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
===了解更多,請(qǐng)下載文獻(xiàn)或者前來咨詢我公司業(yè)務(wù)員哦,更多產(chǎn)品文獻(xiàn)等著您!