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日期:2015/3/2瀏覽:497次
除了質(zhì)量、服務(wù)等條件,在購買ELISA試劑盒的時候,還要根據(jù)其特點來分析選購條件。如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個因素。盡管現(xiàn)在購買源自動物的抗體越來越容易,我們?nèi)杂斜匾_認一下是否會產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。
在用雙抗夾心法進行ELISA檢測時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合,實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來避免上述問題。
一直以來,ELISA試劑盒以其敏感性高、特異性強、重復性好的優(yōu)點,在科研中深受廣大,科研工作者的喜愛。
ELISA試劑盒雖然有多種類型,不過它們都有一個共同特點,就是進行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進行捕獲。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑點ELISPOT是兩種特殊的類型,In-cell ELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細胞進行固定和通透化,然后再用抗體原位檢測。ELISPOT有點像蛋白印跡Western blot,先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細胞,然后在膜上檢測細胞分泌的抗原形成斑點。此外,我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是384孔板進行ELISA實驗。