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日期:2015-08-05瀏覽:1075次
其實ELISA的原理及方法是比較簡單的,相關ELISA操作的資料,網(wǎng)上很多,但是真正到自己親手操作的時候還是會犯糊涂。今天我們就來仔細說說這方面的問題,上海滬鼎解析:實驗新手如何【運用ELISA試劑盒】?
1.對于一些小分子的檢測,一般來說,要用競爭法ELISA去檢測,也要購買采用這個方法的盒子。一般細胞因子的檢測,都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測,因為因子分子量比較大,一般10幾個KD左右,很容易找到兩個或者多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不同的表位,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結合小分子并固相化。解決方案就是酶標板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶標記的檢測抗體,顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
2.還有一個問題,這是不是客戶的誤區(qū),就是拿來一個指標就想當然地嘗試用ELISA去檢測。ELISA檢測方法簡單,靈敏度高,但是該檢測活性的檢測活性,該做western的做western。
·特別說明
① ELISA試劑盒規(guī)格有96T和48T兩種,打開包裝后要及時檢查所有物品是否齊全完整。
② 一周內使用可存于4℃,需長時間存放或多次使用建議存于-20℃。
·上海滬鼎對ELISA的操作提醒:
① 將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
② 液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
③ 溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
④ 洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
⑤ 洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
另外,要想熟練的【運用ELISA試劑盒】,還需要多動手多操作。今天是八月的*個工作日,您有需要了解的相關信息或者資料內容,都可以在本公司中留言。上海滬鼎隨時歡迎!