這是一項(xiàng)比較熱門的實(shí)驗(yàn)，如果您需要用到、了解的話可以拿出空余的兩分鐘時(shí)間來閱讀下面的文章。我們把本實(shí)驗(yàn)的步驟分為了八個(gè)部分，下面就來分條說明。 
    試劑都是有它的配制方法的，這里的實(shí)驗(yàn)是培養(yǎng)大鼠胰島細(xì)胞，在我公司中所能看見的大鼠二字也就是試劑盒方面了，其中的種屬大鼠是非常熱銷的。我們?cè)谧鲞@個(gè)實(shí)驗(yàn)的*步就是要將一周齡Wistar大鼠斷頸處死，熱愛動(dòng)漫的朋友有沒有莫名的想到了兵長呢？然后就要把它放于75%乙醇浸泡15 分鐘，無菌取出胰腺，于冰冷無菌D-Hanks’液中漂洗，用眼科剪仔細(xì)清除脂肪、包膜、血管等胰外組織，轉(zhuǎn)入青霉素小瓶中。
    第二個(gè)步驟就是要加入少量無菌D-Hanks’液，用眼科剪剪成0.1-1.0 mm3 大小的碎片，用滴管輕輕吸出上層細(xì)小脂肪碎塊和油滴，再用無菌D-Hanks’液反復(fù)清洗 8~10 次，加入10 倍體積無菌消化酶液[胰蛋白酶-膠原酶消化液：0.05  g 胰蛋白酶，0.025 g Ⅴ型膠原酶(663 U/mg)，0.05 g 葡萄糖，溶于100mL 無Ca2+、Mg2+的0.01 mol/L PBS(pH 值為 7.4)溶液，用0.22 µm 微孔濾膜濾菌]，38℃±1℃消化，消化過程中不斷震蕩，10 分鐘后棄去上清液。
    那么多的數(shù)字文字看上去有些眼花繚亂啊，其實(shí)操作時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)沒有那么麻煩的。
    我們第三步要用無菌D-Hanks’液將組織塊清洗 2~3 次，加入新鮮酶液繼續(xù)消化，重復(fù)上述步驟，此時(shí)組織塊邊緣模糊。
    第四個(gè)步驟的時(shí)候要將組織塊浸入消化酶液中，38℃±1℃消化10 分鐘，將消化酶液與組織塊分開，組織塊重新加入新鮮消化酶液進(jìn)行消化；而原消化酶液1500  rpm離心 10 分鐘，取沉淀即為消化下的細(xì)胞，重新用無菌D-Hanks’懸浮，離心，重復(fù) 1~2 次，再用培養(yǎng)基洗 2~3 次，用培養(yǎng)基懸浮即得細(xì)胞懸液。
    實(shí)驗(yàn)過程到這里已經(jīng)說了一半了，為了完成漂亮的實(shí)驗(yàn)，您在操作的時(shí)候也要注意一些小細(xì)節(jié)部分
    我們第五步的時(shí)候，要將消化過的組織塊重復(fù)消化5~6 次至組織塊消化*，重復(fù)以上操作。
    第六步，合并幾次所得細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為 2×105個(gè)細(xì)胞/mL，將細(xì)胞懸液接種于24 孔塑料培養(yǎng)板中，每孔1 mL，置于37℃，5%CO2，飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
    文章看起來前面文字密密麻麻，中間有些松散。這里也能夠看出，前面的步驟流程是比較多的，到了中間就會(huì)稍微的簡單一些，因?yàn)椴襟E上有重復(fù)上面的，做過了的再次重復(fù)就會(huì)簡單一點(diǎn)。
    到了第七步的時(shí)候，由于成纖維細(xì)胞貼壁要比胰島細(xì)胞迅速，接種15 h 后，輕輕振蕩培養(yǎng)板，將上面未貼壁的細(xì)胞接入新的培養(yǎng)板中，可除去部分成纖維細(xì)胞。
    第八步，將新培養(yǎng)板中細(xì)胞培養(yǎng) 48 小時(shí)后，換新鮮配置的含有2.5 ng/mL 的碘乙酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)5 h，可除去絕大部分成纖維細(xì)胞，而胰島細(xì)胞不受傷害，換不含碘乙酸的培養(yǎng)基洗2 次，并換不含碘乙酸的培養(yǎng)基在 37℃、5% CO2，飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
    我們要每隔3天換培養(yǎng)液，獲得單層胰島細(xì)胞。
    您看滬鼎培養(yǎng)大鼠胰島細(xì)胞，八步即能完成實(shí)驗(yàn)。開學(xué)迎來，您需要大鼠elisa試劑盒的話現(xiàn)在個(gè)訂購七折優(yōu)惠！本實(shí)驗(yàn)中我們需要用到的試劑有：
1、D-Hanks’液
2、蛋白酶
3、Ⅴ型膠原酶
4、葡萄糖
5、碘乙酸
     歡迎您購買我公司產(chǎn)品，在您實(shí)驗(yàn)的過程中，如果遇到了產(chǎn)品以及技術(shù)的問題來電即可，我們將為您安排技術(shù)人員給您做全程的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。