国产欧美一区二区精品视频,精品国产福利在线观看91啪,久久久久久精品免费免费自慰,亚洲第一天堂在线观看视频

歡迎訪問上海滬鼎生物科技有限公司網(wǎng)站

返回首頁|聯(lián)系我們

全國統(tǒng)一服務(wù)熱線:

18221656311
技術(shù)文章您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 技術(shù)探討-細(xì)菌中提取分泌蛋白質(zhì)的方法

技術(shù)探討-細(xì)菌中提取分泌蛋白質(zhì)的方法

日期:2013-07-22瀏覽:2855次

上海滬鼎生物根據(jù)售后處理客戶問題解答;結(jié)合技術(shù)部的實驗探討,特別針對細(xì)菌中提取分泌蛋白質(zhì)有哪些方法做出解釋,本次實驗僅供參考依據(jù),具體以實驗標(biāo)準(zhǔn)為準(zhǔn)。
客戶需要從細(xì)菌中提取一種可分泌至培養(yǎng)基上清的一種小分子多肽,按照文獻(xiàn)的方法是取細(xì)菌上清后用氯仿抽提,可反復(fù)做過多次,蛋白總是沒有活性,不知道各位同仁有沒有什么好方法?請指教!
以下參考意見:
參考一:
氯仿是有機(jī)溶劑,所以但沒有活性。分離這種分泌性蛋白質(zhì),可以先將上清液透析,然后過柱。

參考二:
蛋白要保持活性,必須維持三維構(gòu)象,而在有機(jī)溶劑處理的情況下,蛋白的三維構(gòu)象被破壞,自然就沒有活性了。
如果你的培養(yǎng)液是高鹽濃度的,你可以在得到上清的可溶性蛋白后,加入5-10倍體積的復(fù)性液,以稀釋鹽濃度,防止在下一步透析過程中隨著鹽濃度的降低,造成蛋白析出沉淀而喪失活性,然后用透析袋進(jìn)行透析,4度以防止蛋白降解,4-6小時,然后冷凍干燥,這樣得到的蛋白就能保持活性了。

參考三:
你的蛋白鏈內(nèi)有二硫鍵么?結(jié)構(gòu)一般不會太復(fù)雜吧?除非有復(fù)雜的二硫鍵,這么小的蛋白,復(fù)性應(yīng)該不是主要矛盾。
一些小蛋白如果在有機(jī)溶劑中發(fā)生的疏水結(jié)構(gòu)的改變是可逆的,而且疏水性較強(qiáng),那可能就可以用氯仿抽提,很容易和大部分蛋白分開,不過脂類和脂蛋白肯定去不掉。
但是能溶于氯仿,你的蛋白我懷疑很有可能一般的水相條件并不是很好溶,先確定一下這個問題,然后結(jié)合你的測活方法,看看是不是在測活的時候蛋白失活的。

參考四:
我的蛋白確實是在一般的水相條件不好溶,活性的檢測方法沒什么問題,
氯仿抽提后用6M的尿素溶解,加ddH2O 倍比稀釋后檢測活性! 這是文獻(xiàn)上的方法,可總是沒有活性。 不知道是不是氯仿抽提的方法有問題? 氯仿抽提法有沒有什么要注意的地方?

參考五:
培養(yǎng)上清中沒有尿素,可能蛋白濃度不高,但還是要確定一下蛋白能溶么?
或是直接純化前取上清測活看看,到底是不是氯仿的問題。

參考六:
我所提的蛋白是不溶于水的,但是在6M、8M的尿素中是可容的
取上清做證實上清是有活性的,所以我覺得是尿素沒有將我所需求的蛋白抽提出來,不知道是不是細(xì)節(jié)上出了些問題?各位,有沒有更好的辦法呢?

參考七:
是氯仿沒有把我所需的蛋白抽提出來

 

上海滬鼎是一家研究經(jīng)銷生化試劑的代理商,我司擁有一支雄厚的技術(shù)團(tuán)隊,為客戶提供完善的售前售后服務(wù),及真實的實驗。您有任何問題均可訂購我司試劑盒。生物試劑等產(chǎn)品。

上一篇:抗生素在細(xì)胞培養(yǎng)中的比較

下一篇:石蠟片子所運用的染色方法

企業(yè)qq 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

18221656311

掃一掃,添加微信

卢湾区| 溧阳市| 龙川县| 崇州市| 磐安县| 保康县| 双城市| 沾益县| 门源| 杭州市| 神农架林区| 东乡县| 大新县| 申扎县| 湖北省| 城市| 梅河口市| 临猗县| 大洼县| 高台县| 大竹县| 明溪县| 洛隆县| 杨浦区| 胶南市| 都兰县| 北海市| 桑日县| 堆龙德庆县| 静海县| 新闻| 饶河县| 班玛县| 和林格尔县| 无极县| 察哈| 古蔺县| 银川市| 罗平县| 天长市| 安化县|