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2016-09-13
外泌體是一種直徑為30-100nm的納米級(jí)脂質(zhì)包裹體結(jié)構(gòu)，內(nèi)部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物質(zhì)，包括腫瘤細(xì)胞在內(nèi)的幾乎所有類型的細(xì)胞，都可以產(chǎn)生并釋放外泌體。外泌體由細(xì)胞分泌釋放出來(lái)，在血液等體液內(nèi)傳播，zui后又可被其他細(xì)胞吞噬，是細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng)，從外泌體研究方向而言，干細(xì)胞、免疫、microRNA、靶向給藥等都是熱門研究領(lǐng)域，2013年諾貝爾生物/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予三位在細(xì)胞囊泡方面貢...2016-09-08
ELISA實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題分析異常結(jié)果描述原因分析對(duì)策白板顯色步驟結(jié)束后，酶標(biāo)板所有孔均無(wú)顏色。陽(yáng)性對(duì)照不顯色。試劑已過(guò)效期，或不同試劑盒組分混用檢查試劑的組分及批號(hào)，確認(rèn)未過(guò)期以及所有組分均屬對(duì)應(yīng)的試劑盒。不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑不能混用。錯(cuò)加、漏加試劑底物、顯色劑A或B嚴(yán)格按說(shuō)明書的步驟操作，加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致，以減少漏加現(xiàn)象。洗板及加樣過(guò)程中，酶標(biāo)受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等，確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈。終止液...2016-09-05
二抗在IF、IHC、WB、ELISA、FC、EMSA、IP和CHIP等多種研究應(yīng)用中起到重要作用。正確選擇二抗可以增加信號(hào)檢測(cè)，減少背景和非特異染色，優(yōu)化您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如何選擇二抗？1.根據(jù)一抗的種屬來(lái)源：GoatantiMouseIgG(H+L),HRP2.根據(jù)一抗的類別亞型：GoatantiMouseIgG(H+L),FITCGoatAntiRabbitIgG(γ),PEGoatAntiMouseIgM,FITC3.根據(jù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法：熒光、化學(xué)發(fā)光、顯色？Goatanti...2016-08-31
經(jīng)甲醛固定的部分組織細(xì)胞，因固定過(guò)程中可能會(huì)形成醛鍵或羧甲基而封閉部分抗原決定簇，使免疫組化標(biāo)記敏感性明顯降低，因此在染色前，有些抗原需進(jìn)行修復(fù)或暴露?？乖迯?fù)方法可分為化學(xué)方法和物理方法。化學(xué)方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制濃度與消化時(shí)間要適度。常用的物理方法有單純加熱、微波處理和高壓加熱。在選用這三種方法時(shí)，浸泡切片的緩沖液的離子強(qiáng)度和pH、加熱的溫度和時(shí)間均影響著抗原修復(fù)效果。1、pH的應(yīng)用范圍及選擇抗原修復(fù)液的pH非常重要，有效的抗原修復(fù)pH要比修復(fù)液...2016-08-24
良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結(jié)果的基礎(chǔ)和前提。由于免疫組化染色過(guò)程中存在很多步驟或環(huán)節(jié)，每一個(gè)步驟或環(huán)節(jié)都可能影響到染色的zui終結(jié)果，因此，要做好一張高質(zhì)量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技術(shù)員和病理醫(yī)生密切配合、相互協(xié)調(diào)、共同努力才能保證做出合格的免疫組化切片。雖然免疫組化染色可以存在各種各樣的問(wèn)題，但從染色的結(jié)果看，一般可分為兩類：無(wú)色片（即無(wú)陽(yáng)性信號(hào)）和“雜音”染色片（有陽(yáng)性信號(hào)）。一、無(wú)色片染色結(jié)束后，切片中見(jiàn)不到任何陽(yáng)性信號(hào)。這是常規(guī)工作中比...2016-08-18
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)對(duì)照各有所用：一般陽(yáng)性對(duì)照是用來(lái)檢測(cè)試驗(yàn)系統(tǒng)是否正確，若陽(yáng)性對(duì)照為陰性，說(shuō)明檢測(cè)系統(tǒng)不正確；陰性對(duì)照一般是用無(wú)關(guān)抗原，陰性對(duì)照通常是排除試劑盒檢測(cè)中是否存在非特異性吸附現(xiàn)象，若陰性對(duì)照為陽(yáng)性，說(shuō)明抗體能夠非特異性結(jié)合無(wú)關(guān)抗原，那么用于檢測(cè)標(biāo)本，其特異性就值得懷疑了；空白對(duì)照主要是檢測(cè)各個(gè)步驟中試劑是否有問(wèn)題，也可以檢測(cè)是否有非特異性吸附現(xiàn)象，具體又可以分包被空白對(duì)照、抗原空白對(duì)照、一抗空白對(duì)照、酶標(biāo)抗體空白對(duì)照……，正規(guī)的商品化的試劑盒經(jīng)過(guò)條件優(yōu)化，只需要...2016-08-15
ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的，無(wú)論是對(duì)實(shí)驗(yàn)的硬件條件還是對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作人員的技術(shù)要求，都是如此。因此在做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要注意以下幾點(diǎn)。1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過(guò)2%?？捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保...