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2017-05-18
從培養(yǎng)的細(xì)胞和組織中提取總蛋白是實(shí)驗(yàn)室非常常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)步驟，從大多數(shù)類型的細(xì)胞和組織中提取總蛋白比較容易，但是從脂肪組織中提取高質(zhì)量和高濃度蛋白質(zhì)是非常困難的。脂肪組織有白色和棕色脂肪兩種類型，被稱為白色脂肪組織（WAT）和棕色脂肪組織（BAT）。脂肪組織中含有許多脂滴，蛋白質(zhì)含量小于細(xì)胞總數(shù)的2%。低蛋白含量使得從脂肪中分離高濃度蛋白挑戰(zhàn)性。以下是幾種從脂肪組織中提取蛋白的方法：A.RIPA緩沖液提取法：脂肪組織通過(guò)含有表面活性劑的緩沖液（例如RIPA緩沖液）勻漿，離心后，收...2017-05-10
每一位科研人員都希望自己做的實(shí)驗(yàn)?zāi)艿玫揭粋€(gè)的結(jié)果，但是在操作過(guò)程中難免出現(xiàn)一些或大或小的問(wèn)題。ELISA檢測(cè)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中zui為靈敏的技術(shù)手段，但是也免不了出現(xiàn)花板，假陽(yáng)性，全顯色，全部顯色，顯色比空白還低等等的問(wèn)題。今天上海滬鼎為您總結(jié)7步ELISA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，希望對(duì)ELISA新手們有所幫助。1、包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時(shí)，師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這...2017-05-04
培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，均改制成粉末。今天下面的文章中給大家介紹培養(yǎng)基的配制原則。1、選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)微生物生長(zhǎng)繁殖都需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水及能源。不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的。例如自養(yǎng)型微生物能從...2017-04-20
在培養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候，有的同學(xué)會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞不貼壁的，到底是什么原因會(huì)出現(xiàn)這種情況呢?下面上海滬鼎給大家簡(jiǎn)單講解一下!可能原因如下：●胰蛋白酶消化過(guò)度●支原體污染●培養(yǎng)基pH值過(guò)堿（NaHCO3分解）●細(xì)胞老化●接種細(xì)胞起始濃度太低或太高解決方法：●縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度●分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物●使用無(wú)菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無(wú)菌CO2●啟用新的保種細(xì)胞●調(diào)節(jié)*接種細(xì)胞濃度上海滬鼎生物科技有限公司主營(yíng)：Elisa試劑盒...2017-04-11
在哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，由于小鼠體小，飼養(yǎng)管理方便，易于控制，生產(chǎn)繁殖快，研究zui深，有明確的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，已擁有大量的近交系、突變系和封閉群，因此在各種實(shí)驗(yàn)研究中，用量zui大，用途zui多。今天上海滬鼎給大家講解如何給小鼠灌胃!小鼠灌胃方法比較簡(jiǎn)單，需要關(guān)注的只有兩點(diǎn)：一是要保持小鼠的頭部和頸部成一直線，方便灌胃針頭進(jìn)入；二是動(dòng)作要輕柔，從口角進(jìn)入，防止損失食道。做的多了自然就熟練了。具體操作過(guò)程如下：1.準(zhǔn)備灌胃針頭。一般可以從市場(chǎng)上面買到，實(shí)在沒(méi)有的話，可以用12號(hào)的針...2017-03-30
抗體，作為科研者們經(jīng)常會(huì)使用到的試劑，那么它的保存也一定非常重要?？贵w的活性和使用效果和抗體是否保存得當(dāng)有很大的關(guān)系，如果抗體保存得當(dāng)，大部分的抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。1、收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在12000rpm離心1-5分鐘后再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存！Abcam的抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管，只有在12000rpm離心1-5分鐘才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來(lái)。即使是在10000rpm離心也會(huì)導(dǎo)致離心不*，導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象！2、對(duì)于abcam大部分抗體，比較...2017-03-21
用ELISA試劑盒做實(shí)驗(yàn)雖說(shuō)操作方法簡(jiǎn)便快速，但是操作技術(shù)的影響也是檢測(cè)結(jié)果的關(guān)鍵因素之一，操作者得細(xì)心，用心。下面公司技術(shù)人員總結(jié)了幾點(diǎn)，想做ELISA實(shí)驗(yàn)的同學(xué)快來(lái)瞧瞧吧！一、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。吸入液體時(shí)的的方法是吸兩檔打一檔，防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。二、液體全部加入酶標(biāo)孔后，將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s，使液體充分混合均勻，也使其得到充分的反應(yīng)。三、盡量做...