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2013-04-09
ELISA試劑盒酶標(biāo)記抗體的制備酶標(biāo)記抗體的制備方法主要有兩種，即戊二醛交聯(lián)法和過碘酸鹽氧化法。（1）戊二醛交聯(lián)法：戊二醛是一種雙功能團(tuán)試劑，它可以使酶與蛋白質(zhì)的氨基通過它而聯(lián)結(jié)。堿性磷酸一般用此法進(jìn)行標(biāo)記。交聯(lián)方法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接加入酶與抗體的混合物中，反應(yīng)后即得酶標(biāo)記抗體。ELISA中常用的酶一般都用此法交聯(lián)。它具有操作簡(jiǎn)便、有效（結(jié)合率達(dá)60%-70%）和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)是交聯(lián)反應(yīng)是隨機(jī)的，酶與抗體交聯(lián)時(shí)分子間的比例不嚴(yán)格，結(jié)合物的大小也不均...2013-04-07
化學(xué)試劑純度分類我國的試劑規(guī)格基本上按純度（雜質(zhì)含量的多少）劃分，共有高純、光譜純、基準(zhǔn)、分光純、優(yōu)級(jí)純、分析和化學(xué)純等7種。國家和主管部門頒布質(zhì)量指標(biāo)的主要優(yōu)級(jí)純、分級(jí)純和化學(xué)純3種。（1）優(yōu)級(jí)純，又稱一級(jí)品或保證試劑，99.8%，這種試劑純度zui高，雜質(zhì)含量zui低，適合于重要精密的分析工作和科學(xué)研究工作，使用綠色瓶簽。（2）分析純（AR），又稱二級(jí)試劑，純度很高，99.7%，略次于優(yōu)級(jí)純，適合于重要分析及一般研究工作，使用紅色瓶簽。（3）化學(xué)純（CP），又稱三級(jí)試劑，...2013-04-01
簡(jiǎn)述成人胰腺消化、胰島分離方法：尸體胰腺原位灌洗后置UW液中，4℃保存運(yùn)輸。到實(shí)驗(yàn)室后在4℃Euro-Collins液中清除非胰組織，從胰管內(nèi)插入穿刺針，絲線縫扎后用注射器灌注Liberase酶溶液（1.5mg/ml）。胰腺充分膨脹后將胰腺切片，置消化罐中并放入數(shù)顆玻璃珠，加500μm孔徑的不銹鋼絲網(wǎng)，旋緊罐蓋。開啟蠕動(dòng)泵將剩余的Liberase酶溶液泵入罐內(nèi)，控制罐內(nèi)溫度37℃，手動(dòng)振搖消化罐循環(huán)消化，于10分鐘后開始取樣鏡檢，待大部分胰島分離后用冷的含10%胎牛血清（FB...2013-03-29
如何選擇陽性對(duì)照？陽性對(duì)照即是100%出現(xiàn)該結(jié)果的“實(shí)驗(yàn)”組，材料是確定的；陰性對(duì)照則是肯定不會(huì)出現(xiàn)結(jié)果的“實(shí)驗(yàn)組”，材料也是確定的；之所以加引號(hào)，是因?yàn)槌藢?shí)驗(yàn)需要驗(yàn)證的變量，其他條件全部都是一樣的，用來排除其他實(shí)驗(yàn)情況對(duì)結(jié)果產(chǎn)生的影響。例如，驗(yàn)證一轉(zhuǎn)基因玉米是否有抗藥性，需要選擇同種的轉(zhuǎn)基因成功的抗藥玉米做陽性對(duì)照，無轉(zhuǎn)基因的做陰性對(duì)照，從而保證除了該基因其他條件一致；一個(gè)成功的實(shí)驗(yàn)，通常情況下必須有陽性對(duì)照和陰性對(duì)照排除其他干擾情況如果您需要合適的陽性對(duì)照，請(qǐng)核查數(shù)據(jù)表...2013-03-27
干擾素（IFN）是一種廣譜抗病毒劑，并不直接殺傷或抑制病毒，而主要是通過細(xì)胞表面受體作用使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白，從而抑制乙肝病毒的復(fù)制；同時(shí)還可增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）、巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的活力，從而起到免疫調(diào)節(jié)作用，并增強(qiáng)抗病毒能力。干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質(zhì)（主要是糖蛋白），是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。它們?cè)谕N細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長(zhǎng)，以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。實(shí)驗(yàn)步驟1.制備誘生劑：采用NDVF系弱毒株，以雞胚尿囊液...2013-03-25
ELISA雙抗體夾心法及間接法的正確操作步驟elisa試劑盒原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法（圖a）、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測(cè)小分子抗原或...2013-03-21
軟瓊脂（softagar）實(shí)驗(yàn)一般用來檢測(cè)細(xì)胞的集落形成能力?，F(xiàn)在這種方法越來越多的用于分離癌細(xì)胞，也可以用來確認(rèn)癌細(xì)胞是否具有癌化特性，為進(jìn)一步做腫瘤小鼠移植模型奠定理論基礎(chǔ)。該方法看似簡(jiǎn)單，但如果細(xì)節(jié)掌握不好，往往導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或數(shù)據(jù)缺乏說服力。如果你曾經(jīng)在這個(gè)實(shí)驗(yàn)上栽了跟頭，請(qǐng)不妨在如下幾個(gè)方面進(jìn)行嘗試：1.要確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中所使用的瓊脂處于*液體狀態(tài)（80℃），尤其是在做基底時(shí)，如果瓊脂凝固過快會(huì)導(dǎo)致基底不均一；2.做瓊脂基底是應(yīng)避免產(chǎn)生小氣泡，一旦有小氣泡產(chǎn)生，應(yīng)...